生化分析儀是細(xì)胞培養(yǎng)過程中開展生化檢測工作的重要設(shè)備，長期以來，我國細(xì)胞培養(yǎng)行業(yè)所用的動(dòng)生化分析儀主要依賴進(jìn)口，在生物制藥企業(yè)研發(fā)中心、中試車間、生產(chǎn)車間所用的生化分析儀幾乎全部使用進(jìn)口設(shè)備。近期，深圳西爾曼公司推出了首款國產(chǎn)M-900全自動(dòng)細(xì)胞培養(yǎng)生化分析儀，其檢測項(xiàng)目達(dá)到了11測試（配置ISE模塊），在本領(lǐng)域填補(bǔ)了國內(nèi)空白。本測評通過一系列實(shí)驗(yàn)，以及在監(jiān)測模擬常規(guī)檢測環(huán)境下儀器的運(yùn)轉(zhuǎn)情況，驗(yàn)證該款生化分析儀的檢測性能及在細(xì)胞行業(yè)的應(yīng)用能力。

1  材料：

1.1 細(xì)胞培養(yǎng)液樣本：某大型制藥公司CHO細(xì)胞培養(yǎng)液

1.2 儀器與試劑：

1.2.1儀器：西爾曼科技M-900生化分析儀

1.2.2試劑：葡萄糖、乳酸、谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品由自西爾曼科技提供，谷氨酰胺、葡萄糖、硫酸銨分析純試劑購自于Sigma

2  檢測原理：

    所有檢測項(xiàng)目上機(jī)參數(shù)均按照原廠家配套說明書設(shè)置，檢測方法：葡萄糖、乳酸、谷氨酸、谷氨酰胺采用氧化酶-電極法；鈉、鉀、鈣、銨離子采用離子選擇性電極法

3  性能驗(yàn)證方法：

3.1精密度驗(yàn)證：

選用深圳市西爾曼公司標(biāo)準(zhǔn)液測試儀器精密度（或者選用國家標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控液）。分析儀在正常條件下按常規(guī)測試程序先行定標(biāo)，然后對標(biāo)準(zhǔn)液連續(xù)測定10次，分別求取定值參考物質(zhì)內(nèi)各分析元素測定值的均值和標(biāo)準(zhǔn)差,計(jì)算各分析元素的變異系數(shù)（CV）

3.2 正確度驗(yàn)證：

選用深圳市西爾曼公司標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行準(zhǔn)確度測試.（或者選用國家標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控液）分析儀在正常條件下按測試程序先行定標(biāo)，然后對標(biāo)準(zhǔn)液連續(xù)測定5次，分別求取標(biāo)準(zhǔn)液內(nèi)各分析元素測定值的均值，計(jì)算各分析元素測定值與參考物質(zhì)定值的偏差(B)

3.3 測量范圍驗(yàn)證：

選擇高值濃度標(biāo)本（H，高值標(biāo)本濃度盡量接近線性范圍的上限）和低值濃度標(biāo)本（L）各1 份，濃度范圍要覆蓋儀器說明書給出的線性范圍。將高值濃度標(biāo)本與低值濃度標(biāo)本分別按L、1H+4L、2H+3L、3H+2L、4H+1L、H 的比例混合，配成 6 份不同濃度的標(biāo)本，隨機(jī)排列，每份混合血清標(biāo)本測定2 次，記錄結(jié)果。將實(shí)測值與預(yù)期值進(jìn)行回歸分析。若所有實(shí)驗(yàn)點(diǎn)在坐標(biāo)紙上呈明顯直線趨勢，用直線回歸對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，得直線回歸方程Y＝a X+b，同時(shí)計(jì)算相關(guān)系數(shù)r。

3.4方法比對驗(yàn)證：

每天選取8份細(xì)胞培養(yǎng)液樣本，分別用使用cedex bio為對照系統(tǒng)和M-900為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，對上述各組標(biāo)本按l～8順序和8～l順序重復(fù)測定，5 d完成。記錄測定結(jié)果，計(jì)算每份標(biāo)本每種方法測定結(jié)果均值，重復(fù)測定值間差值的絕對值以及2套檢測系統(tǒng)測定結(jié)果均值間的差值。

4. 結(jié)果：

4.1 精密度正確度驗(yàn)證：

4.2 測量范圍驗(yàn)證結(jié)果：

4.3 方法對比驗(yàn)證：

4.3.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)試劑檢測對比：

4.3.2 細(xì)胞樣本檢測數(shù)據(jù)：

原始數(shù)據(jù)涉及工藝保密，不便于公開，相關(guān)性分析根據(jù)原始數(shù)據(jù)分析

4.3.3 梯度稀釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

將配套的標(biāo)準(zhǔn)液葡萄糖：1.00g/L，乳酸：11.11mmol/L按比例稀釋后的樣品分別連續(xù)測量三次葡萄糖、乳酸含量，分析所得數(shù)據(jù)誤差、標(biāo)準(zhǔn)偏差。

4.3.3 梯度稀釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

5. 結(jié)論：

    M-900生化分析儀在細(xì)胞培養(yǎng)工作環(huán)境下，在常開機(jī)狀態(tài)下，每天工作時(shí)間為4h，評價(jià)共計(jì)28d。平均檢測數(shù)樣本為150個(gè)／d，檢測項(xiàng)目數(shù)6項(xiàng)目／d，檢測速度約為60個(gè)樣本/小時(shí)與廠家聲明的檢測速度基本一致。評價(jià)期間出現(xiàn)故障報(bào)警2次，系統(tǒng)恢復(fù)所需時(shí)間為10 min，故障性質(zhì)均為軟件缺陷，工程師對軟件版本進(jìn)行升級后故障未重復(fù)出現(xiàn)，整個(gè)評估實(shí)驗(yàn)過程中未出現(xiàn)儀器硬件故障。另外對儀器常規(guī)操作合理性和便捷程度的判斷、對儀器檢測速度的判斷、儀器日常保養(yǎng)操作情況的判斷以及日常故障情況的判斷。通過一個(gè)月左右的使用，了解到西爾曼M-900生化分析儀日常操作合理便捷；日常保養(yǎng)設(shè)計(jì)合理，保養(yǎng)過程操作簡便，相對于光學(xué)比色法，M-900生化分析儀檢測速度更快，可滿足儀器常規(guī)使用的要求；儀器故障發(fā)生率較低，硬件部分在整個(gè)試用過程中未出現(xiàn)故障，軟件部分雖有故障發(fā)生，但隨著軟件版本的升級，在試用的后期也趨于穩(wěn)定，未再出現(xiàn)影響檢測的故障。綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)論，國產(chǎn)生化分析儀M一900的檢測性能能夠滿足日常細(xì)胞培養(yǎng)生化檢測的要求，使用簡便，運(yùn)行穩(wěn)定，故障率低，可以滿足日平均樣本量在300個(gè)測試的細(xì)胞培養(yǎng)生化檢測需求。